杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建

被引：61

作者：

刘威生

冯晨静

杨建民

刘冬成

张爱民

李绍华

机构：

[1] 中国农业大学农学与生物技术学院

[2] 河北农业大学

[3] 中国科学院遗传与发育生物学研究所

[4] 中国科学院植物研究所北京

来源：

果树学报 | 2005年 / 06期

关键词：

杏; ISSR(inter-simple sequence repeat); 反应体系; 退火温度; 优化;

D O I：

10.13925/j.cnki.gsxb.2005.06.006

中图分类号：

S662.2 [杏];

学科分类号：

摘要：

以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系为:20μL的反应体系中含10ng模板DNA、0.1mmol/LdNTP、0.25μmol/LPrimer、2.5mmol/LMg2+,0.5UTaqPolymerase。适宜退火温度为50-52.1℃。用引物UBC825和UBC868〔序列为(GAA)5〕在优化的反应条件下建立了5个种12份杏材料的ISSR指纹图谱。

引用

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页数：4

共 5 条

[1] 李种质资源ISSR反应体系的建立
乔玉山
章镇
房经贵
沈志军
赵密珍
[J]. 果树学报, 2003, (04) : 270 - 274
[2] 苹果品种ISSR指纹图谱构建
宣继萍
章镇
房经贵
高志红
车胜利
[J]. 果树学报, 2002, (06) : 421 - 423
[3] 杨梅不同品种的ISSR分析
邱英雄
傅承新
孔航辉
[J]. 农业生物技术学报, 2002, (04) : 343 - 346
[4] 系统与进化植物学中的分子标记[M]. 科学出版社 , 邹喻苹等编著, 2001
[5] Evaluation of inter-simple sequence repeat analysis for mapping in Citrus and extension of the genetic linkage map[J] . A. A. Sankar,G. A. Moore.TAG Theoretical and Applied Genetics . 2001 (2-3)

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