金黄色葡萄球菌外毒素B特异性适体的筛选及其应用

被引：10

作者：

甘龙杰 ^{[1
]}

兰小鹏 ^{[1
,2
]}

江丽 ^{[1
]}

马立强 ^{[2
]}

机构：

[1] 福建医科大学福州总医院临床医学院

[2] 南京军区福州总医院全军医学检验研究所

来源：

生物技术通讯 | 2010年 / 21卷 / 02期

关键词：

指数富集的配体系统进化技术; 金黄色葡萄球菌外毒素B; 适体;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q789 [基因工程的应用];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的:利用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,筛选能与金黄色葡萄球菌外毒素B(SEB)特异、高亲和力结合的单链DNA(ssDNA)适体,并将该适体应用于患者血清标本的检测。方法:从体外合成的96核苷酸随机ss-DNA文库中,以羧基磁珠作为筛选介质,经逐步PCR扩增、筛选,获得针对SEB的高亲和力、高特异性适体;利用荧光素标记适体测定筛选过程中各轮结合力;利用酶连接适体方法检测适体特异性和结合力。结果:经过13轮筛选,ssDNA文库与SEB的结合百分率从1.1%提高到39.8%,增加了36倍;获得的ssDNA适体(A11)针对SEB的特异性强,与金黄色葡萄球菌表面蛋白A(SPA)结合低,并能初步识别患者血清。结论:利用SELEX技术筛选获得了特异结合SEB的高亲和力的ssDNA适体,为金黄色葡萄球菌的临床诊断与治疗奠定了基础。

引用

页码：232 / 235

页数：4

共 4 条

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