柚ISSR-PCR反应体系的建立与优化

被引:3
作者
彭瑜 [1 ]
王劲 [2 ]
胡进耀 [2 ]
代其林 [2 ]
苏智先 [2 ]
机构
[1] 四川省环境科学与生物多样性保护重点实验室
[2] 绵阳师范学院生态研究中心
关键词
柚; ISSR-PCR; 反应体系;
D O I
10.16246/j.issn.1673-5072.2007.03.018
中图分类号
S666.3 [柚(文旦)]; Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
071007 [遗传学]; 090201 [果树学];
摘要
以柚类种质资源为材料,对影响其ISSR-PCR反应结果的模板浓度、Taq酶浓度、dNTPs浓度、引物浓度、循环次数进行了探讨.结果表明,25μL的反应体系为:20-80ng的DNA,0.2mM dNTPs,2.0mM MgCl2,1μM引物,1.5U Taq酶.PCR扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性40sec,48-58℃(视引物而定)1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃延伸7min.
引用
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页数:4
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