phbB、phbC基因在大肠杆菌中的表达及对马铃薯植株的转化和检测

被引:15
作者
雍伟东
梁铁兵
谢安勇
李枞
宋艳茹
机构
[1] 中国科学院植物研究所
基金
北京市自然科学基金;
关键词
聚-β-羟基丁酸酯,表达载体,转基因马铃薯;
D O I
暂无
中图分类号
Q946.47,S532.01 [];
学科分类号
摘要
利用从真养产碱杆菌(Alcaligeneseutrophus)H16染色体DNA中克隆到的催化聚 β 羟基丁酸酯(poly β hydroxybutyrate,PHB)生物合成的两个关键酶基因:依赖NADPH的乙酰乙酰CoA还原酶基因(phbB)以及PHB合酶基因(phbC),同时利用大肠杆菌高效表达载体pKK223 3,构建了嵌合有phbB和phbC基因的表达载体pKCB,转入大肠杆菌JM109,通过显微镜观察及气相色谱分析检测PHB的合成。在确证克隆基因正确的基础上构建了马铃薯块茎特异性表达载体pPSAGB(含phbB基因)、pBIBGC(含phbC基因)和pPSAGCB(含phbB和phbC双基因),转化5个马铃薯品种,经检测获得20个转基因阳性株系。
引用
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