人关节软骨细胞的体外分离、培养与鉴定

被引：15

作者：

童迅 ^{[1
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赵海恩 ^{[1
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张栋 ^{[1
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赵新文 ^{[1
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曾照辉 ^{[1
]}

马保安 ^{[1
]}

机构：

[1] 第四军医大学唐都医院骨科

[2] 解放军第九七医院骨科

来源：

现代生物医学进展 | 2012年 / 12卷 / 16期

关键词：

人关节软骨; 软骨细胞; 细胞学;

D O I：

10.13241/j.cnki.pmb.2012.16.019

中图分类号：

R329 [人体组织学];

学科分类号：

100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];

摘要：

目的:研究人关节软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,观察各代人关节软骨细胞的形态学特性。方法:取人创伤性截肢的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养。通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对细胞进行鉴定。结果:两步酶消化法消化出的软骨细胞呈圆形,培养2-3天,细胞贴壁、变形,呈三角形或多角形,2周左右细胞融合成层,传代5次后出现去分化。软骨细胞增殖和生长缓慢。形态学、免疫组织化学染色显示细胞培养5代以内可以保持表型的稳定。结论:本研究采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化法获得大量高纯度、高活性的人关节软骨细胞。5代以内细胞生长良好,生物学特性明显,适合于实验研究,5代以后出现去分化现象。

引用

页码：3040 / 3044

页数：5

共 8 条

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