天麻AFLP分析技术体系的建立

被引:24
作者
谢渊 [1 ]
张小蕾 [2 ]
李毅 [1 ]
蒋朝晖 [3 ]
吴晓黎 [3 ]
单可人 [1 ]
机构
[1] 贵阳医学院分子生物学重点实验室
[2] 贵阳医学院医学检验系
[3] 贵阳医学院贵阳中医学院
关键词
天麻; AFLP分析; DNA指纹技术;
D O I
10.16519/j.cnki.1004-311x.2007.01.016
中图分类号
R282.5 [药材鉴定];
学科分类号
100803 [中药鉴定学];
摘要
目的:建立一个适于天麻研究用的AFLP分析技术体系。方法:以11份天麻种质资源为试材,构建供试天麻的AFLP指纹图谱,同时对AFLP分析过程中DNA提取、酶切、连接、预扩增、引物筛选、选择性扩增、电泳和银染等多种因素进行分析。结果:AFLP分析体系要求DNA模板质量高,酶切连接可同时进行,37℃、9h效果较好,预扩增要求高质量DNA聚合酶,产物15倍稀释作为选择性扩增模板效果好,制胶前玻璃板的处理和银染时间的掌控对获得较好结果非常关键。P-GGA/M-GT引物构建的指纹图谱拥有可清晰辨认的扩增条带45条。结论:AFLP指纹技术具有稳定性高、重复性好等优点,可用于天麻DNA分析。
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