APAAP桥联酶标技术的建立及初步应用

本文运用淋巴细胞杂交瘤技术获得5个产生抗碱性磷酸酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株,同时设计一种改良ELISA方法用于筛选抗碱性磷酸酶单克隆抗体。筛选出的单克隆抗体能与碱性磷酸酶结合形成可溶性的复合物,即碱性磷酸酶一抗碱性磷酸酶抗体(APAAP)复合物。这些APAAP复合物仍保留有较高的酶活性,并可改良ELISA方法确定其酶一抗酶抗体的配制比例。在免疫组化染色中,APAAP复合物通过桥联二抗及显色系统能在组织原位较好地显示与一抗相对应的抗原物质。这种APAAP桥联酶标记技术显色鲜明,染色背景清晰,染色后的组织形态仍保存完好。APAAP桥联酶标记技术结合免疫金银染色进行免疫组化双重标记也取得了满意的标记效果。初步应用结果表明APAAP桥联酶标记技术是一种简便、灵敏、易于推广的实用免疫组织化学方法。