背景:现代药理学研究证实,赤芍总苷具有抑制血小板和红细胞聚集、抗凝和抗血栓、抗动脉粥样硬化、保护心脏和肝脏、抗肿瘤等广泛的药理活性。目的:体外培养制备乳鼠损伤心肌细胞,通过细胞培养液中超氧化物歧化酶活性、丙二醛和一氧化氮含量的变化,分析赤芍总苷对损伤心肌细胞的保护作用。设计:观察对比实验。单位:西安交通大学生命科学与技术学院生物工程系,西安交通大学医学院骨病研究所。材料:实验于2003-02/06在西安交通大学生命科学与技术学院生物工程系完成。选取出生1～3d的SD乳鼠44只,将培养48h的心肌细胞制备成42瓶用于实验,随机分为6组:正常对照组、药物损伤组、赤芍总苷0.625mg/L组、赤芍总苷3.125mg/L组、赤芍总苷15.625mg/L组、阳性对照组,7瓶/组。方法:无菌条件下进行心肌细胞原代培养。正常对照组不加任何药物,药物损伤组加入异丙基肾上腺素使其终浓度为100mg/L,赤芍总苷0.625,3.125,15.625mg/L组加入异丙基肾上腺素30min后分别加入浓度为0.625,3.125,15.625mg/L的赤芍总苷,阳性对照组加入异丙基肾上腺素30min后加入辅酶Q10使其终浓度为100mg/L。然后进行各项指标检测,超氧化物歧化酶活性采用黄嘌呤氧化酶法测定,丙二醛含量为硫代巴比妥酸法测定,一氧化氮含量用硝酸还原酶法测定。主要观察指标:①各组细胞培养液中超氧化物歧化酶活性的测定。②各组细胞培养液中丙二醛和一氧化氮含量的比较。结果:①各组细胞培养液中超氧化物歧化酶活性的测定:与正常对照组比较,药物损伤组总超氧化物歧化酶、CuZn-超氧化物歧化酶和Mn-超氧化物歧化酶水平均明显下降(P<0.05或<0.01);而赤芍总苷各剂量组和阳性对照组上述指标均有不同程度的改善(P<0.05或<0.01),其中赤芍总苷15.625mg/L组的保护作用接近或优于阳性对照组犤(79.50±10.67),(80.30±13.50);(48.24±13.26),(49.73±10.23);(31.26±10.22),(30.57±9.57)μkat/L;P>0.05犦。②各组细胞培养液中丙二醛和一氧化氮含量的比较:药物损伤组明显高于正常对照组(P<0.01),赤芍总苷各剂量组和阳性对照组均有降低丙二醛和一氧化氮含量的作用,并且赤芍总苷的保护作用呈剂量依赖性,随着赤芍总苷加入量的增高而加强,其中高剂量组的丙二醛含量接近正常对照组水平犤(5.41±1.81),(4.48±0.94)μmol/L,P>0.05犦,一氧化氮含量与阳性对照组相近犤(81.83±9.08),(82.41±12.37)mol/L,P>0.05犦。结论:赤芍总苷对异丙基肾上腺素造成的心肌损伤具有保护作用,且呈现剂量依赖关系,可能与增强细胞抗氧化作用、减少自由基和脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。
