胶原酶解离体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞

用 0 .2 %胶原酶Ⅰ解离原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞。取出主动脉胸、腹段 ,剥除外膜 ,血管纵向剖开 ,去除内皮细胞。撕下中膜 ,快速剪切 ,用 0 .2 %胶原酶液置摇摆仪上振摆消化约 8h( 37℃ ,35次 /min) ,离心弃上清 ,加培养液 ,在 37℃温箱培养。结果光电显微镜下见细胞呈梭形或长梭形。用抗肌动蛋白α actin的单克隆抗体鉴定平滑肌细胞的特异性肌动蛋白 ,见胞浆内有明显的细胞细丝 ,呈现淡黄棕色 ,细丝与细胞长轴相平行 ,呈现阳性。表明用 0 .2 %胶原酶解离原代培养法进行平滑肌细胞培养 ,细胞产量高、质量好、培养时间短、稳定性强、培养成功率高 ,是一种快速简便的培养方法