基于PCR技术的绿脓杆菌快速检测方法研究

被引:19
作者
张伟
李闻
张伟尉
刘红艳
黄正
机构
[1] 华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室,华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室,华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室,华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室,华中科技大学同济医学院公共卫生学院教育部环境与健康重点实验室武汉,武汉,武汉,武汉,武汉
关键词
绿脓杆菌; PCR; ETA; 快速检测;
D O I
暂无
中图分类号
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号
摘要
目的:应用PCR技术来实现绿脓杆菌的快速鉴定。方法:绿脓杆菌特异性的PCR扩增引物是根据已报道的ETA基因序列设计的,同时考察该PCR方法的特异性和敏感性。另外,一种不提取基因组DNA而直接制备简易模板的直接PCR方法在本研究中也被尝试。结果:PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析,仅在包含绿脓杆菌基因组DNA的样品中得到单一条带。直接PCR方法也成功扩增出同样的条带,而整个过程在4 h内完成。结论:这种扩增绿脓杆菌ETA基因的直接PCR方法对绿脓杆菌的鉴定来说是一种快速、特异、敏感和相对简单的方法。
引用
收藏
页码:1065 / 1067
页数:3
相关论文
共 6 条
[1]  
NAD -dependent inhibition of protein synthesis by Pseudomonas aeruginosa toxin A. Iglewski BH,KabatD. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 1975
[2]  
Detection of Pseudomonas aeruginosa from clinical and environmental samples by amplification of the exotoxin a gene using PCR. Khan AA,Cerniglia CE. Applied and Environmental Microbiology . 1994
[3]  
C loning, nucleotide sequence, and expression in Escherichia coli of the exotoxin A structural gene ofPseudomonas aeruginosa. Gray GL,Sm ith DH,Baldridge JS,et al. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 1984
[4]  
Specificity of the Pseudomonas aeruginosa PAO1 lipoprotein I gene as a DNA probe and PCR target region within the Pseudomonadaceae. Saint O,Romeyer F,Lebel P,et al. J GeneralM icrobiol . 1992
[5]  
Detection of Pseudomonas aeruginosa from ovine fleece washings by PCR amplification of 16 S ribosomal RNA. K ingsford NM,Raadsma HW. Veterinary Microbiology . 1995
[6]  
Complete nucleotide sequence of a 16 S ribosomal RNA gene from Pseudomonas aeruginosa. Toschka HY,Hopfl P,LudwigW,et al. Nucleic Acids Research . 1988