三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞TGF-β、CTGF基因表达和蛋白分泌的影响

目的探讨三七总苷(PNS)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)基因表达和蛋白分泌的影响,为临床上应用PNS延缓肾衰竭的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清。应用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株(HK-2)。应用ELISA方法检测HK-2细胞培养上清液TGF-β1蛋白分泌量;W estern B lot方法检测CTGF的蛋白表达;RT-PCR方法检测TGF-β1、CTGFmRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,TGF-β1、CTGF基因表达和蛋白分泌量均增高(P<0.01),而PNS 400～800mg.L-1可恢复尿毒血清所诱导的TGF-β1基因表达(P<0.01),200～800 mg.L-1可恢复尿毒血清诱导的TGF-β1蛋白分泌(P<0.01);200～800 mg.L-1可恢复尿毒血清所诱导的CTGF基因表达和蛋白分泌(P<0.01)。结论在体外实验中,PNS可在一定程度上降低尿毒血清诱导的HK-2细胞TGF-β1、CTGF基因表达和蛋白分泌量,减少细胞外基质聚集,从而延缓人肾小管-间质纤维化的进展,有望成为一种能有效延缓肾纤维化进展的中药。