利用pIRES载体构建TCR独特型重组质粒

被引：1

作者：

黄梅娟 ^{[1
]}

李扬秋 ^{[2
]}

杨力建 ^{[2
]}

陈少华 ^{[2
]}

机构：

[1] 青岛大学医学院第二附属医院青岛市中心医院血液科

[2] 暨南大学医学院血液病研究所

来源：

医学分子生物学杂志 | 2008年 / 05期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

pIRES载体; T细胞受体; 独特型; 重组质粒; 佐剂;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q784 [基因的重组];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的利用可同时表达两个基因片段的pIRES作为载体,构建TCR独特型重组质粒,为制备诱导抗T细胞肿瘤免疫的TCR独特型DNA疫苗提供基础。方法设计引物,提取Jurkat及Molt4细胞株RNA为模板,RT-PCR法特异性扩增CDR3区,与pIRES经酶切连接后氯化钙法转化,重组质粒经酶切鉴定后测序。结果构建出3种重组质粒pIRES-Jurkat Vβ8、pIRES-Molt4 Vβ2①和pIRES-Molt4 Vβ2②,其中pIRES-Molt4 Vβ2②测序正确,可体外表达Vβ2蛋白。结论利用真核表达载体pIRES可成功构建TCR重组质粒,并有可能用于进一步克隆佐剂基因片段入pIRES的多克隆位点,提高DNA疫苗的免疫原性。

引用

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