实时荧光定量PCR鉴定小麦矮腥黑穗菌技术研究

被引:12
作者
年四季 [1 ,2 ]
袁青 [1 ,2 ]
殷幼平 [1 ]
蔡俊 [1 ]
王中康 [1 ]
机构
[1] 重庆大学生物工程学院
[2] 泸州医学院基础医学院
关键词
TCK; TCT; 实时荧光定量PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S435.121 [病害];
学科分类号
090401 ; 090402 ;
摘要
【目的】建立荧光定量PCR体系以准确灵敏的鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn,TCK)【方法】根据筛选的TCK独有差异基因片段(1322bp)设计特异性引物对CQUTCK4/CQUTCK5和TaqMan探针CQUP1,建立SYBRGreenⅠ荧光染料法和TaqMan水解探针法定量PCR检测体系,并对体系进行优化。【结果】建立的两套定量PCR检测体系的检测下限相当,可达到0.1fg,对应的拷贝数为2.31×104个,检测灵敏度比常规PCR高2~3个数量级,均可成功鉴别出TCK与小麦网腥黑穗病菌(Tilletiacaries(DC)Tul,TCT),并可快速准确检测小麦矮腥黑穗菌冬孢子和检测罹病小麦植株体内的侵染菌丝体。【结论】建立的2种定量PCR检测技术可运用于小麦矮腥黑穗病的早期诊断。
引用
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页码:4403 / 4410
页数:8
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