植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立

被引：34

作者：

廖晓兰

朱水芳

陈红运

黄文胜

罗宽

赵文军

马荣群

朱建裕

机构：

[1] 湖南农业大学植保系

[2] 国家质检总局动植物检疫实验所

[3] 西北农林科技大学

[4] 湖南农业大学植保系长沙

[5] 北京

[6] 长沙

[7] 杨凌

来源：

植物病理学报 | 2002年 / 04期

关键词：

TaqMan探针; 实时荧光 PCR; 植原体; 检测; 鉴定;

D O I：

10.13926/j.cnki.apps.2002.04.013

中图分类号：

S432.4 [侵（传）染性病害];

学科分类号：

090401 ;

摘要：

本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR。结果表明 ,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号 ,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时 ,仅能检测到该组植原体产生荧光信号 ,检测的敏感性比常规的 PCR-电泳检测高约 10 0倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测 ,本方法特异性强 ,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测 ,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌、难培养菌的检测鉴定和分类提供了新方法

引用

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