microRNA-1诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

被引:30
作者
文通 [1 ]
魏云峰 [1 ]
王梦洪 [1 ]
汪泱 [2 ]
曾俊义 [1 ]
彭小平 [1 ]
李宾公 [1 ]
机构
[1] 南昌大学第一附属医院心内科
[2] 南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所
关键词
miRNA-1; 骨髓间充质干细胞; 心肌样细胞;
D O I
10.16352/j.issn.1001-6325.2011.01.005
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的研究microRNA-1(miRNA-1)能否诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化。方法构建大鼠miRNA-1表达载体,分离扩增培养及鉴定大鼠MSCs。脂质体法转染大鼠第4代MSCs,实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测转染miRNA-1质粒后MSCs的miRNA-1表达水平。分别于转染2、4和6 d后用RT-PCR检测心肌重要转录因子GATA4、NKx2.5和MEF2C的mRNA表达,免疫荧光检测心肌特异蛋白I(cTnI)的表达。结果 90%以上的MSCs表达MSCs重要标志物CD29、CD44;未检测到造血前体细胞标志抗原CD34、白细胞标志抗原CD45的表达。转染miRNA-1质粒后,miRNA-1表达水平明显上调。转染miRNA-1质粒2、4和6 d后,GATA4、NKx2.5和MEF2C的mRNA表达逐渐增强。第4和6天后可见cTnI阳性表达细胞。结论 miRNA-1能诱导大鼠MSCs向心肌样细胞分化。
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