TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡的改进

被引：18

作者：

董小莉 ^{[1
]}

谭宁 ^{[1
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符永恒 ^{[1
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邓宇珺 ^{[1
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孙凯亮 ^{[2
]}

机构：

[1] 广东省心血管病研究所,广东省人民医院,广东省医学科学院

[2] 南方医科大学

来源：

中国病理生理杂志 | 2010年 / 26卷 / 05期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

心肌细胞凋亡; 冰冻切片; 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R541 [心脏疾病];

学科分类号：

1002 ; 100201 ;

摘要：

目的:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)是检测细胞凋亡的常用方法,但以往仍有TUNEL假阳性率高的报道。本实验目的在于探讨应用TUNEL检测心肌细胞凋亡时增强其特异性的方法。方法:缺血再灌注心肌组织的石蜡切片(2μm)和冰冻切片(3μm)进行TUNEL染色。分为石蜡切片HE染色组,石蜡切片常规TUNEL组,冰冻切片改良TUNEL组。石蜡切片常规TUNEL组完全按照试剂盒说明书进行,光学显微镜下观察;冰冻切片改良TUNEL组使用荧光素(FITC)标记的dUTP及4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DA-PI)双重荧光染色,在共聚焦显微镜下观察。结果:TUNEL改良法凋亡背景清晰,阳性细胞主要分布在缺血再灌注损伤区域,其凋亡检出率与石蜡切片HE染色相比无显著差异(P>0.05);常规TUNEL组凋亡背景清晰度较差,非缺血再灌注损伤区域亦有大量阳性细胞出现,其凋亡率明显高于石蜡切片HE染色(P<0.01)。结论:冰冻切片改良TUNEL法可能是更适宜研究SD大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的方法。

引用

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页数：3

共 4 条

[1] 冰冻和石蜡切片对TUNEL染色结果的影响 [J].