转染人骨形态发生蛋白-2基因的羊骨髓间充质干细胞的异位成骨研究

被引:11
作者
汤亭亭
徐小良
戴鮨戎
郁朝锋
朱六龙
楼觉人
机构
[1] 上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,美国华盛顿大学医学院骨科研究室,,,,
关键词
骨形态发生蛋白质类; 干细胞; 大鼠,裸; 转染;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因转染羊骨髓间充质干细胞(MSCs)后的成骨活性。方法实验分为3组:(1)hBMP-2转染细胞组,(2)半乳糖苷酶基因(βgal)转染细胞组,(3)未转染细胞组。从羊骨髓中分离培养MSCs,基因转染后利用免疫沉淀和Westernblot方法检测BMP-2的表达,并在体外进行碱性磷酸酶(ALP)和VonKossa染色、ALP定量测定、透射电镜观察。分别将细胞悬液注入裸鼠股后部肌内,分期进行X线和组织学检查。结果Westernblot检测发现只有hBMP-2转染细胞组的MSCs表达并分泌hBMP-2。该组于转染后第12d,ALP活性达高峰,与其它两组比较,差异有显著性意义;于16d后出现钙结节,而其它两组未见。透射电镜观察见hBMP-2转染细胞组的细胞内粗面内质网、线粒体和溶酶体增多。裸鼠肌内注射细胞悬液后3周,hBMP-2转染细胞组即有异位成骨,6周时明显增多,其它两组仅见纤维组织形成或微量成骨。结论hBMP-2基因转染能诱导羊MSCs分化为成骨细胞,并在裸鼠体内诱导成骨。
引用
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