大鼠不同程度脊髓损伤后的中性粒细胞活性

目的:动态观察大鼠轻重度脊髓损伤后组织中髓过氧化物酶活性,探讨中性粒细胞在脊髓损伤中的作用。方法:实验于2005-07/10在东南大学附属中大医院中心实验室完成。选择SD大鼠102只,随机数字表法分为3组,假手术组(仅咬除椎板,不损伤脊髓),轻度损伤组,重度损伤组,各组34只。采用Allen’s撞击法建立脊髓损伤模型。术后3,12,24,48h,1周测定脊髓组织髓过氧化物酶活性。于术后24h,1周进行斜板试验,将大鼠纵轴与斜板纵轴一致,斜板每次升高5°,记录大鼠能停留5s的最大夹角。于术后24h,1周进行BBB评分,将动物置于直径2m的平面光滑场地自由活动,观察后肢的关节活动、步态等运动功能4min。于术后24h,1周取手术区脊髓行苏木精-伊红染色进行病理学检查。结果:纳入动物102只,2只因初次麻醉效果不佳而加大麻醉剂量,于术后4h内死亡,随即补上。①假手术组术后3h脊髓组织中髓过氧化物酶活性为(30.19±1.22)nkat/g,以后各时间点均维持在此水平;轻度损伤组、重度损伤组伤后3h髓过氧化物酶活性即明显升高[分别为(41.24±1.08),(43.48±3.28)nkat/g,P<0.01],伤后24h达到峰值[分别为(53.46±4.42),(73.76±4.15)nkat/g,P<0.01],然后逐渐下降,术后1周基本恢复正常。重度损伤组髓过氧化物酶活性在术后12,24,48h较轻度损伤组高,差异有显著性意义(P<0.05)。②假手术组大鼠斜板试验能停留5s的最大夹角均在55°以上,重度损伤组术后24h、1周斜板试验与轻度损伤组相比差异有显著性意义[术后24h分别为(30.68±3.87)°,(37.73±2.55)°;术后1周分别为(36.25±5.18)°,(45.63±4.17)°,P<0.01]。BBB评分假手术组均为21分,轻度损伤组评分明显减少,术后24h为2～4分,1周为8～10分(P<0.01);重度损伤组术后24h和1周评分更低,分别为0～2分和2～4分,与轻度损伤组比较两个时间点差异均有显著性意义(P<0.01)。③假手术组神经元形态正常,未见肿胀、坏死、空泡等改变。脊髓损伤后24h见局灶性出血、神经元肿胀、变圆、核固缩、碎裂,尼氏小体淡染或消失。损伤后1周显示神经元减少,可有空泡形成。轻度损伤组术后24h,1周均较重度损伤组病理改变轻。结论:中性粒细胞参与了脊髓继发性损伤的机制,并且在一定程度上,脊髓损伤的严重程度与中性粒细胞活性的高低有关。