水稻巯基蛋白酶抑制剂基因(OCI)转化甘薯获得转基因植株

被引：19

作者：

蒋盛军

刘庆昌

翟红

邬丽莎

王玉萍

机构：

[1] 中国农业大学农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室

[2] 中国农业大学农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室北京

[3] 北京

来源：

农业生物技术学报 | 2004年 / 01期

基金：

国家杰出青年科学基金;

关键词：

甘薯; 根癌农杆菌; 转基因植株; 水稻巯基蛋白酶抑制剂基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

S531 [甘薯（红薯）];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将水稻巯基蛋白酶抑制剂基因(OCI)导入甘薯(Ipomoeabatatas)品种栗子香,获得了转基因植株。所用菌株为根癌农杆菌LBA4404,其携带的pBinh质粒上含有新霉素磷酸转移酶Ⅱ(NPTⅡ)基因和OCI基因。将继代培养3d后的栗子香胚性悬浮细胞与LBA4404(OD600nm=0.5)共培养4d。将共培养后的胚性悬浮细胞首先在含有2mg/L2,4-D和300mg/LCarb(carbencillin)、但不含有Kan(kanamycin)的MS液体培养基中培养5d,然后在含有2mg/L2,4-D、50mg/LKan和300mg/LCarb的MS液体培养基中进行选择培养。选择培养4周后,将直径约1mm的抗Kan细胞团转移到添加2mg/L2,4-D、50mg/LKan和300mg/LCarb的MS固体培养基上,共转移200个细胞团,诱导得到了8个胚性愈伤组织。将这些抗Kan胚性愈伤组织转移到添加1mg/LABA、50mg/LKan和100mg/LCarb的MS固体培养基上,通过体细胞胚胎发生途径获得了13株再生植株。PCR和PCR-Southern检测结果表明,获得的13株再生植株中7株是转基因植株。

引用

页码：34 / 37

页数：4

共 5 条

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