猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

被引：12

作者：

邓宇 ^{[1
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张荣 ^{[2
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丛雁方 ^{[2
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张建武 ^{[2
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袁世山 ^{[2
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文心田 ^{[1
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郑浩 ^{[2
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机构：

[1] 四川农业大学动物医学院

[2] 中国农业科学院上海兽医研究所

[3] 西昌学院动物科学学院

来源：

畜牧兽医学报 | 2011年 / 42卷 / 07期

关键词：

猪源牛病毒性腹泻病毒; 实时荧光定量RT-PCR; TaqMan探针;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

本研究旨在建立一种荧光定量PCR检测方法,用于猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDVs)检测,同时能鉴别诊断猪瘟病毒(CSFV)。根据BVDVs与CSFV 5′-UTR保守序列,设计一套引物和特异TaqMan探针,以本实验室构建的猪源BVDVs 5′-UTR阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线。以构建的标准品为模板进行了特异性、敏感性、重复性试验、并应用于临床检测。结果显示,该方法检测CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性;最低可检测到每个反应相当于10拷贝的标准品DNA;重复性试验的批内变异系数为0.20%～0.95%;应用所建立方法对临床样品进行检测,其结果与普通RT-PCR结果的符合率为86.7%。本研究建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于猪感染BVDVs、猪瘟疫苗污染BVDVs的监测。

引用

页码：1046 / 1050

页数：5

共 8 条

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