不同载体构建人神经生长因子的比较

被引：4

作者：

戚菁 ^{[1
]}

李素芹 ^{[2
]}

李琳 ^{[1
]}

潘明洁 ^{[2
]}

李越希 ^{[1
,2
]}

机构：

[1] 南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系

[2] 南京军区军事医学研究所

来源：

药物生物技术 | 2009年 / 16卷 / 01期

关键词：

人神经生长因子; 基因克隆; 真核表达; 生物活性;

D O I：

10.19526/j.cnki.1005-8915.2009.01.008

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

探讨人神经生长因子(hNGF)在不同信号肽同一载体与不同载体表达量的差异。应用分子生物学技术从pcDNA3·1-β-NGF中获得β-NGF基因,并对它进行替换载体和优化信号肽,构建两个新重组质粒pMD902-β-NGF和pcDNA3·1-His-β-NGF,通过酶切、PCR及测序鉴定,重组质粒构建成功;利用脂质体转染技术,将重组质粒pMD902-β-NGF、pcDNA3·1-β-NGF和pcDNA3·1-His-β-NGF转入中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中,通过ELISA技术,检测到CHO细胞上清中有NGF的表达,优化信号肽的pcDNA3·1-His-β-NGF表达量高于没有优化信号肽的pcDNA3·1-β-NGF,重组质粒pMD902-β-NGF表达量最低。鸡胚背根神经节法检测,表达产物都能促进神经节的生长。通过实验分析发现,3个重组质粒表达水平有较大差异。

引用

页码：37 / 42

页数：6

共 9 条

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