云南腾冲热泉土壤微生物基因组文库的构建与分析

被引：15

作者：

蔡莹

陈秀珍

杨克迁

黄力

董志扬

机构：

[1] 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发重点实验室

来源：

微生物学报 | 2006年 / 03期

关键词：

免培养技术; 未培养微生物; 环境基因组文库;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2006.03.018

中图分类号：

S154.3 [土壤微生物学];

学科分类号：

071012 ; 0713 ;

摘要：

采用冻融、蛋白酶K、SDS-高盐-加热处理法联合的方法,直接从云南腾冲地区的一个弱碱性高温热泉沉积样品中提取和分离环境混合基因组DNA,产量为每克样品1～2μg DNA,用Promega试剂盒纯化后进行PstⅠ部分酶切处理,电泳回收3～8kb的片段后,构建了pSK(+)为载体的基因组文库,共获得25000个阳性克隆,平均插入片段长度为4.6kb。通过随机DNA序列测定和基因注释,发现外源插入片段含有未见报道的序列。

引用

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