将GNA基因导入莴苣(L.sativa)及其表达的研究

被引:8
作者
郭文俊
李瑶
唐克轩
董铮
叶明鸣
沈大棱
机构
[1] 复旦大学遗传学研究所
关键词
莴苣; 雪花莲凝集素; CaMV35S启动子; 农杆菌转化; 聚合酶链式反应; Western杂交;
D O I
10.15943/j.cnki.fdxb-jns.1998.04.042
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
将含CaMV35S启动子的雪花莲凝集素基因置换Ti质粒载体pBI121中的GUS基因得到了pBIGNA质粒,将其导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404(pBIGNA)菌株.通过该农杆菌介导转化莴苣子叶,筛选得到了17个具有卡那霉素抗性的转化子,其中3个转化子PCR鉴定的结果为阳性,用Western杂交检测了这3个转化子中的GNA含量,结果表明第2号转化子中的GNA表达量为可溶性蛋白总量的0.4%.由于GNA在0.1%浓度时就对包括蚜虫在内的刺吸式昆虫具有显著的毒杀作用,因此推测此转基因莴苣可能具有抗蚜虫能力.另用DotWestern杂交检测LBA4404(pBIGNA)中GNA的表达量,排除了农杆菌污染的可能.
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