地塞米松对哮喘小鼠肺液清除功能障碍的作用

目的:研究支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺液清除功能的变化及地塞米松的作用,并探讨其可能机制。方法:雌性C57/BL6小鼠48只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组。以卵蛋白(OVA)联合佐剂腹腔注射(第1、15天)加雾化吸入(第25～29天)方法复制小鼠哮喘模型。分别在末次激发后2 h及24 h测定各组小鼠肺组织病理变化及湿干重比值(W/D),应用免疫组化法测定各组水通道蛋白5(AQP5)在肺组织中的分布,分别采用实时PCR和蛋白质印迹法测定各组小鼠肺组织中AQP5 mRNA和蛋白质的变化。ELISA法测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞数和细胞因子IFN-γ及IL-13的水平。结果:哮喘组小鼠肺组织W/D较对照组明显升高,末次激发后2 h和24 h分别为4.98±0.46和4.81±0.33,分别升高22.9%和18.7%(P<0.05),且激发后2 h哮喘组小鼠肺组织W/D升高更明显。地塞米松干预组小鼠2 h和24 h肺组织W/D分别为4.01±0.11和4.21±0.14,与哮喘组小鼠相比显著降低(P<0.05);与对照组无显著性差异(P>0.05)。HE染色可见哮喘组小鼠肺组织支气管周围大量以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主的炎细胞浸润;地塞米松干预组小鼠气道炎症程度减轻,支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞比哮喘组明显减少,IFN-γ和IL-13分别为(89.25±9.71)和(52.37±8.69)pg/mL,与哮喘组[IFN-γ和IL-13分别为(66.71±7.51)和(85.49±9.23)pg/mL]相比明显改善(P<0.05)。免疫组化分析表明,AQP5主要表达于Ⅰ型肺泡上皮细胞和气道上皮细胞的腔膜面。哮喘小鼠肺组织中AQP5的表达均较对照组明显减少(mRNA减少约42%,蛋白质减少约64%)。地塞米松上调其表达(与模型组比较,P<0.05)。结论:哮喘小鼠存在肺液清除功能障碍,肺液含量增加可能与AQP5表达下降有关。地塞米松在发挥抗炎作用的同时,还可通过上调AQP5的表达而对哮喘发挥治疗作用。