大肠杆菌O157:H7多克隆抗体纯化

被引：5

作者：

郎婧

金敏

王新为

李君文

晁福寰

机构：

[1] 军事医学科学院卫生学环境医学研究所

来源：

解放军预防医学杂志 | 2008年 / 04期

关键词：

大肠杆菌O157:H7; 多克隆抗体; 纯化;

D O I：

10.13704/j.cnki.jyyx.2008.04.005

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,比较3种纯化方法对抗体性能的影响,为食品检验、临床和血清学检验O157∶H7奠定基础。方法应用传统方法制备大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体,利用盐析法、亲和层析法和抗原吸附法对其进行纯化,采用SDS-PAGE、Bradford法、ELISA等实验技术检测纯化后抗体的纯度、比效价、交叉反应性,从而比较3种纯化方法的纯化效果。结果获得效价1∶131072的大肠杆菌O157∶H7抗血清。亲和层析法所得纯化产物纯度较高,抗体解链为分子量约55 kDa和25 kDa的蛋白,抗原吸附法所得产物纯度次之,盐析法所得产物的纯度较差,有多条杂蛋白条带。抗原吸附法所得纯化产物比效价较高为349.3,并且与其他5株细菌的交叉反应情况相对反应较小。结论亲和层析法和抗原吸附法纯化抗体均有一定的优越性,抗原吸法得到的抗体使用性能较好。

引用

页码：238 / 241

页数：4

共 6 条

[1]

抗体理论与技术.[M].王廷华;李官成;Xin-FuZhou主编;.科学出版社.2005,

[2]

精编分子生物学实验指南.[M].(美)F.奥斯伯(FrederickM.Ausubel)等著;颜子颖;王海林译;.科学出版社.1998,

[3] 与O157诊断血清产生交叉凝集反应的9株赫氏埃希菌的分离鉴定 [J].