改进的甲基化特异PCR法及在抑癌基因p16检测中的应用

被引：9

作者：

赵迎社

张思仲

机构：

[1] 华西医科大学附属第一医院医学遗传室

来源：

中华医学遗传学杂志 | 1999年 / 05期

关键词：

甲基化; CpG岛; p16基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

R730.4 [肿瘤诊断学];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的　介绍一种ＣｐＧ岛甲基化分析方法，即甲基化特异的ＰＣＲ（ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＭＳＰ）法以及对该法的改进。方法　用亚硫酸氢盐修饰被测ＤＮＡ后，再进行甲基化与非甲基化特异的ＰＣＲ扩增，并对ＭＳＰ法进行改进。应用该法分析了颌面部鳞癌中ｐ１６基因５′ ＣｐＧ岛甲基化状态。结果　发现一些颌面部鳞癌组织中有ｐ１６基因５′ ＣｐＧ岛的甲基化。采用加热变性代替强碱变性，用透析法脱盐，以及用限制酶Ｔａｑ Ⅰ取代ＢｓｔＵＩ来判断甲基化与非甲基化的扩增片段等均取得了良好的效果。结论　ＭＳＰ法是一种较为简便、灵敏和具特异性的甲基化检测方法，改进后该方法更加简便可行。

引用

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页数：4

共 3 条

[1]

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