体外培养的成骨细胞中碱性磷酸酶活性的检测方法探讨

检测细胞内碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性是体外研究细胞分化及功能的重要手段。实验根据ＡＬＰａｓｅ活性检测的基本原理，探讨了体外培养的成骨细胞中ＡＬＰａｓｅ活性的检测方法。对９６孔细胞培养成骨细胞，以２００μｌ０．０５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００＋超声破碎细胞，以氢氧化钠终止ＡＬＰａｓｅ分解底物的反应。对人胚成骨细胞而言，细胞裂解产物与底物及０．４ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ的配比比例以４０∶１００∶１００（μｌ）为宜，有较好的灵敏性和可靠性。