人CTLA4Ig和EGFP双基因共表达逆转录病毒载体构建及鉴定

被引:5
作者
贺伟峰
吴军
易绍萱
罗高兴
陈希炜
郑峻松
马兵
雷晓
机构
[1] 第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,第三军医大学附属西南
关键词
CTLA4Ig; EGFP; IRES2; 逆转录病毒; 双基因共表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q782 [基因载体];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
目的 构建并鉴定人CTLA4Ig和增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)双基因共表达逆转录病毒载体。方法 利用基因重组技术将IRES序列与CTLA4Ig和EGFP基因构建到逆转录病毒载体中 ,脂质体法将重组质粒pCTLA4Ig IRES2 EGFP转染PA31 7细胞 ,在G41 8选择压力下 ,通过流式细胞检测筛选得到高效共表达CTLA4Ig和EGFP并能产生高滴度重组逆转录病毒的PA31 7细胞克隆 ,MTT法测定CTLA4Ig生物学活性。结果 成功构建出含IRES序列的CTLA4Ig和EGFP双基因共表达逆转录病毒载体 ,生物学活性测定表明CTLA4Ig生物学活性没有受到影响。结论 IRES序列调控CTLA4Ig与EGFP双基因在细胞中同时独立表达
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共 1 条
[1]
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Opalka, B .
JOURNAL OF CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY, 2000, 126 (07) :391-399