目的建立HPLC法同时测定连翘中连翘苷和连翘酯苷A的含量。方法在色谱柱Agilent Zobax SB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)上进行分离,柱温为30℃,流动相:A相为乙腈;B相为0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱:0~28 min,15%A:85%B,28~33 min,15%→20%A:85%→80%B,33~38 min,20%A:80%B,38~50 min,20%→25%A:80%→75%B,50~60 min,25%A:75%B,流速:1.0 ml·min-1,检测波长:278 nm。结果样品中2种成分得到良好分离,连翘苷和连翘酯苷A分别在0.01975~0.05925 mg·ml-1(r=0.9997),和0.0998~0.2994 mg·ml-1(r=0.9996)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,回收率分别为99.49%和99.18%,RSD分别1.19%和1.04%,样品溶液12 h内稳定。结论该方法操作简单,结果准确,专属性强,可用于连翘药材的质量控制。