红景天苷通过下调ERK1/2信号通路抑制肺癌A549细胞的增殖作用

目的研究红景天苷（Salidroside,Sal）是否通过抑制ERK1/2信号通路介导肺癌A549细胞的增殖作用。方法体外培养A549细胞,四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度Sal对A549细胞增殖率的影响,筛选药物使用最大剂量。细胞锚定增殖实验检测药物对细胞增殖的抑制作用。蛋白质印迹法（Western Blotting）检测MEK信号通路磷酸化水平的变化。体外激酶试验检测药物对丝裂原活化的细胞外信号调节激酶（MEK激酶）活性的抑制作用。CNBr-sepharose 4B Beads结合实验检测药物与MEK的结合。裸鼠荷瘤实验检测药物在体内对肿瘤增殖的抑制作用。结果 Sal在50μmol·L-1以内时,细胞毒性较小,当浓度到100μmol·L-1时,细胞死亡明显增加。A549细胞在细胞锚定增殖实验中形成的克隆数目,不同浓度Sal组明显少于阳性对照组（EGF）组,且具有剂量依赖性（P<0.05）。Sal处理A549细胞组,相对于阳性对照组EGF组,MAPK信号通路ERK及其下游p90RSK磷酸化水平明显下降,具有时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义（P<0.05）,MEK的磷酸化水平差异无统计学意义（P>0.05）。体外激酶和CNBr-sepharose 4B Beads结合实验表明Sal可以结合MEK,并抑制MEK的活性（P<0.05）。裸鼠荷瘤实验显示,药物组肿瘤体积明显小于对照组,具有剂量依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。结论在肺癌A549细胞株中,Sal可以通过靶向MEK,抑制ERK1/2信号通路,进而在体内外起到抗肿瘤的作用。