改良DAS-Dot-ELISA检测西瓜细菌性果斑病菌

被引：11

作者：

熊亮斌 ^{[1
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刘箐 ^{[2
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王天昌 ^{[3
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高丽萍 ^{[1
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王婧 ^{[4
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刘姝彤 ^{[2
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宋蕤 ^{[2
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施颖波 ^{[2
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王军平 ^{[2
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文朝慧 ^{[2
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机构：

[1] 兰州大学基础医学院

[2] 甘肃出入境检验检疫局国家级外繁种子检疫重点实验室

[3] 兰州慧盟生物科技有限公司

[4] 甘肃农业大学食品科学学院

来源：

微生物学通报 | 2010年 / 37卷 / 10期

关键词：

西瓜细菌性果斑病菌; 双抗体夹心Dot-ELISA; 硝酸纤维素膜; 快速检测;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2010.10.026

中图分类号：

S436.5 [瓜果病虫害];

学科分类号：

摘要：

以硝酸纤维素膜为载体,对Dot-ELISA法的封闭条件、包被抗体浓度、点样量等反应条件进行优化,建立改良DAS-Dot-ELISA法快速检测西瓜细菌性果斑病菌。研究发现,以含乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的脱脂奶粉液高温处理后用于封闭,可有效降低背景;轻微振荡可提高杂交效率,减少非特异性结合。改良DAS-Dot-ELISA可快速、经济的检测西瓜果斑病菌,灵敏度达1.9×105CFU/mL。在对两批次种子样品的检测中,改良DAS-Dot-ELISA法检测带菌率分别为8.0%和6.0%,与微孔板ELISA结果完全一致;对每粒种子的检测结果,改良DAS-Dot-ELISA法与微孔板ELISA吻合率平均达99.0%,显示较好的实用前景,同时为快速检测西瓜果斑病菌提供一种新途径。

引用

页码：1551 / 1556

页数：6

共 5 条

[1] 玉米细菌性枯萎病菌改良Dot-ELISA检测研究 [J].

王岭 ;

田世民 ;

高海霞 ;

邹明强 ;

蒋继志 ;

崔霞 ;

胡秀丽 ;

陈立本 .

微生物学通报, 2008, (02) :230-234

[2] 两种NC膜条上马铃薯A病毒DAS-ELISA检测研究 [J].

田世民 ;

施丽飞 ;

周朋 ;

邹明强 ;

薛强 .

微生物学通报, 2007, (04) :712-714

[3] 单抗免疫斑点法和组织印迹法检测百合无症病毒 [J].

李燕宏 ;

吴建祥 ;

洪健 ;

周雪平 ;

叶美琴 .

微生物学通报, 2006, (02) :25-29

[4] 免疫凝聚试纸条和TaqMan探针实时荧光PCR检测西瓜细菌性果斑病菌比较研究 [J].

冯建军 ;

许勇 ;

李健强 ;

Norm W SCHAAD .

植物病理学报, 2006, (02) :102-108

[5]

New subspecies‐specific polymerase chain reaction‐based assay for the detection of Acidovorax avenae subsp. citrulli[J] . O.Bahar,M.Efrat,E.Hadar,B.Dutta,R. R.Walcott,S.Burdman.Plant Pathology . 2008 (4)

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