血液HBV DNA全自动检测及基因分型分析

目的建立血液HBVDNA标本汇集、核酸提取、扩增及检测的全自动筛查模式,对阳性标本进行基因分型和血清学追踪检测,为血液HBVDNA自动化筛查提供科学依据。方法在酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2000加样仪自编程序进行全自动血样汇集(24人份),在MPLC仪上全自动提取标本核酸,应用PCR方法在COBASAMPLICOR进行扩增和检测分析结果,用国际标准核酸质控品考评检出限量,对阳性标本进行基因分型并追踪血清转换过程。结果全自动汇集、全自动核酸提取和扩增及检测HBVDNA95%检出限量为38.9IU/ml,95%CI为(21323)。通过对16512个标本共688个汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0.049%。其中C型3人,B型2人,D型1人,2人未能确定基因型,6例阳性标本追踪发现,3例发生了血清转换现象。结论HBVDNA全自动核酸检测方法可应用于24人份血液混样核酸筛查。