实验性纤维化肝内胶原生成细胞的研究

目的探讨大鼠肝纤维化胶原生成细胞的来源。方法利用免疫组织化学及原位分子杂交技术，对不同阶段（２０周）ＣＣｌ４诱导ＳＤ大鼠纤维化肝内胶原生成细胞Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型前胶原ｍＲＮＡ及其相应胶原蛋白的表达状况进行观察。结果实验早期（２～６周），于中央静脉周围坏死区或其附近聚集的结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ，Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ，α－ＳＭＡ）阳性的Ｉｔｏ细胞及肌成纤维细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ，ＭＦ）表达α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ，其定位与同期该区域内免疫组化显示的相应胶原的分布相对应。实验中期（８～１２周），前胶原ｍＲ ＮＡ杂交信号见于间隔内的ＭＦ、成纤维细胞（Ｆｂ）及间隔旁少量Ｉｔｏ细胞。实验后期（１６～２０周），除新生的“子间隔”外，三种前胶原ｍＲＮＡ杂交信号主要局限于间隔内的Ｆｂ。另外，在肝纤维化的不同阶段肝窦内皮细胞均可见较强ａ１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ杂交信号。肝细胞、胆管细胞及卵圆细胞等未显示胶原生成的任何迹象。结论Ｉｔｏ细胞是肝纤维化时肝内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原生成的先驱细胞，纤维化后期肝内胶原主要来源于间隔内的Ｆｂ及ＭＦ。肝窦内皮细胞作为肝内Ⅳ型胶