应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针

被引：25

作者：

李凌

马文丽

祝骥

朱利娜

宋艳斌

吴清华

郭秋野

郑文岭

机构：

[1] 第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,第一军医大学分子生物学研究所,广州总医院分子肿瘤学研究所广州,广州

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2002年 / 01期

关键词：

RD-PCR; HIV; DNA芯片;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2002.01.027

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0～ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD PCR技术是一种有效的快速制备基因芯片探针的方法

引用

页码：105 / 109

页数：5