目的:建立白头翁中白头翁皂苷D的含量测定方法。方法:采用HPLC测定白头翁皂苷D的含量,色谱条件为依利特Hypersil ODS2C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水-甲酸(38∶62∶0.1),流速1.0 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温25℃,考察不同产地白头翁中白头翁皂苷D的含量差异。结果:白头翁皂苷D线性范围0.311 23.112μg(r=0.999 9),精密度RSD 1.36%,重复性RSD 1.65%,供试品溶液在24 h内稳定,平均加样回收率98.07%(RSD 0.64%)。吉林产白头翁中白头翁皂苷D含量最高(0.256%),比广东产白头翁高了约20倍。结论:该测定方法简便易行、结果准确、重复性好。不同产地的白头翁中白头翁皂苷D的含量差异较大,选用时应慎重。