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反义寡核苷酸对气道平滑肌细胞内皮素转换酶及内皮素1表达的影响
被引：12
作者：
文思成
徐军
钟南山
机构：
[1] 广州呼吸疾病研究所
来源：
关键词：
内皮缩血管肽类,内皮素转换酶,肿瘤坏死因子,寡核苷酸类.反义;
D O I：
暂无
中图分类号：
R363 [病理生理学];
学科分类号：
100104 ;
摘要：
目的探讨肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ α）刺激人气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）内皮素１（ＥＴ １）释放的机制及体外反义内皮素转换酶 寡聚核苷酸（ＥＣＥ ｏＤＮＳ）是否可拮抗ＴＮＦ α诱导人ＡＳＭＣ的ＥＣＥ表达及ＥＴ １分泌。方法离体培养ＡＳＭＣ并导入由阳离子脂质体：Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ携载的反义ＥＣＥ ｏＤＮＳ，观察其对前炎症因子ＴＮＦ α诱导ＥＣＥ基因表达及ＥＴ １释放的影响，采用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法测定培养液ＥＴ １浓度；用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ ＰＣＲ）方法检测ＥＣＥ ｍＲＮＡ的表达量。结果ＴＮＦ α可刺激ＡＳＭＣＥＴ １释放及ＥＣＥｍＲＮＡ表达。ＥＴ １由（７．３±０．８）ｎｇ／Ｌ升至（１０．１±０．３）ｎｇ／Ｌ，（ｔ＝５．５７６，Ｐ＜０．０１）；ＥＣＥｍＲＮＡ的表达由（０．１３２±０．０３２）升至（０．２２８±０．０１５，ｔ＝４．７２４，Ｐ＜０．０１）；导入反义ＥＣＥ ｏＤＮＳ后，ＥＣＥｍＲＮＡ的表达及ＥＴ １的释放均受到抑制，抑制率分别为（３５±１２）％及（２９±５）％。结论ＴＮＦ α刺激人ＡＳＭＣＥＣＥ基因表达增加可能是其刺激细胞ＥＴ １释放的主要原因；反义ＥＣＥ ｏＤＮＳ能拮抗ＴＮＦ α诱
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