基因工程技术制备梅毒螺旋体重组抗原的研究

目的 用基因工程技术制备梅毒螺旋体特异蛋白抗原，以解决梅毒螺旋体不能体外培养而难以获得足量的纯梅毒螺旋体特异蛋白抗原的难题。 方法 以 PCR技术克隆出目的基因，重组后通过 DNA序列测定验证重组质粒中连结有目的基因片段；以 pMALTM-c2为质粒载体， TB1大肠杆菌为宿主菌进行目的基因的转化、诱导和表达，并对表达产物进行蛋白印迹试验检测其血清学活性。结果 PCR克隆出梅毒螺旋体 15 000、 17 000以及 47 000蛋白的基因克隆，其中梅毒螺旋体 17 000以及 47 000在 TB1大肠杆菌中得到稳定的表达，且表达产物显示与梅毒患者血清有非常特异的血清学反应。结论 梅毒螺旋体之目的基因在大肠杆菌中得到了成功表达，并具特异的血清学活性，从而为建立国产化梅毒血清学诊断的新方法奠定了基础。