美洲商陆中新发现的一种抗菌蛋白基因的克隆和表达

被引：10

作者：

刘迎芳

王春霞

赵进东

吴光耀

机构：

[1] 北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京

来源：

植物学报 | 1999年 / 10期

关键词：

美洲商陆; 抗菌蛋白; 基因克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

摘要：

自美洲商陆(PhytolaccaamericanaL.)的种子中发现了一种具有38个氨基酸残基的蛋白(PaAFP),它有明显抑制立枯丝核菌(RhizoctoniasolaniKiihn)作用。依此蛋白的氨基酸序列合成引物,从该种子的mRNA中,通过逆转录PCR,获得了这一基因的具有65个氨基酸的前体蛋白cDNA序列(已在GenBank注册),将这一成熟蛋白的cDNA克隆在pGEX4T1上,并转化到大肠杆菌(E.coli),融合蛋白被大量表达。表达产物经谷胱甘肽Sepharose4B亲合层析,融合蛋白被纯化。纯化后的融合蛋白经凝血酶(thrombin)作用,将谷胱甘肽S转移酶降解,从而获得这一抗真菌蛋白

引用

页码：13 / 17

页数：5

共 12 条

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