MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用

被引：6

作者：

王侦 ^{[1
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陈嘉昌 ^{[2
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何琼 ^{[3
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彭焕玉 ^{[2
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朱振宇 ^{[1
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陈华云 ^{[2
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李明 ^{[4
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机构：

[1] 中山大学中山医学院

[2] 中山大学达安基因诊断中心

[3] 中山大学附属第三医院病理科

[4] 南方医科大学生命科学院

来源：

广东医学 | 2012年 / 33卷 / 12期

基金：

广州市科技计划项目;

关键词：

结直肠癌; SEPT9; 甲基化; 高分辨率熔解曲线; MS-HRM;

D O I：

10.13820/j.cnki.gdyx.2012.12.061

中图分类号：

R735.3 [肠肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响。结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%。36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化。不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果。结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。

引用

页码：1732 / 1734

页数：3

共 4 条

[1]

Limitations and advantages of MS-HRM and bisulfite sequencing for single locus methylation studies [J].