人BNIP3基因在Hela细胞中的表达及定位

被引：1

作者：

陈登宇

刘芸

钟田雨

王蔚

赵明哲

刘靖华

姜勇

机构：

[1] 南方医科大学病理生理学教研室广东省功能蛋白质组学重点实验室

来源：

贵阳医学院学报 | 2009年 / 34卷 / 01期

关键词：

基因,bcl-2; Hela细胞; 线粒体; 荧光免疫测定; 细胞内定位;

D O I：

10.19367/j.cnki.1000-2707.2009.01.003

中图分类号：

R73-3 [肿瘤学实验研究];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:构建BNIP3-HA融合蛋白的真核表达载体,观察BNIP3在Hela细胞中表达及其定位。方法:采用两步克隆法将HA和BNIP3的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上,随后转染Hela细胞。BNIP3经AlexaFluor 488免疫荧光标记,线粒体用MitoFluor Red 589染色后在荧光显微镜下观察BNIP3的表达和定位。结果:重组质粒经酶切、聚合酶链反应(PCR)和测序鉴定构建正确,并在Hela细胞中能够表达,在荧光显微镜下观察,BNIP3-HA融合蛋白分布于线粒体。结论:成功构建BNIP3-HA融合蛋白表达载体并在Hela细胞线粒体中表达。

引用

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共 3 条

[1] BNIP3基因及其与肿瘤的关系 [J].