共 5 条
分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立
被引：4
作者：
王新华
沈敏
周鹏飞
钟发刚
温建新
机构：
[1] 新疆农垦科学院畜牧兽医所!石河子
来源：
关键词：
单克隆抗体(McAb);
牛病毒性腹泻病毒(BVDV);
D O I：
暂无
中图分类号：
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号：
摘要：
用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ） 感染ＭＤＢＫ 细胞，将感染细胞培养物冻融后离心取上清经ＰＥＧ 沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取血清抗体效价高的免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ 细胞在ＰＥＧ作用下融合，产生杂交瘤细胞，用间接ＥＬＩＳＡ 法检测杂交瘤细胞生长孔上清，筛选阳性杂交瘤细胞株。以有限稀释法克隆２ ～３次，得到８ 株分泌抗ＢＶＤＶ 的单克隆抗体（ＭｃＡｂ） 杂交瘤细胞株。８ 株ＭｃＡｂ 对ＢＶＤＶ、猪瘟（ＣＳＦＶ） 均呈阳性反应。杂交瘤细胞核内染色体数为９８～１０５ 条。ＭｃＡｂ 属性为：６ 株属ＩｇＧ１ ，２ 株属ＩｇＧ２ａ 。经抗原结合位点分析，８ 株ＭｃＡｂ 可识别３ 个不同的抗原决定位点。将杂交瘤细胞注射ＢＡＬＢ／Ｃ 小鼠腹腔诱生腹水，其抗体效价提高３ ２００ 倍以上，有３ 株腹水单抗的ＥＬＩＳＡ 效价在１∶１０ 万以上，最高ＭｃＡｂ 株达１∶２０ 万。杂交瘤在液氮中保存１～２ ａ 后复苏仍能稳定地分泌抗ＢＶＤ 病毒的ＭｃＡｂ 。所有腹水ＭｃＡｂ 对ＢＶＤＶ 的中和指数均大于５０（ｌｏｇ１０１ ．７），最高达５０１１８（ｌｏｇ１０４．７） 。ＭｃＡｂ 作免疫扩散试验均无沉淀线
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