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用普通琼脂糖代替低熔点胶回收DNA片段
被引:6
作者:
顾其华
李玲芝
舒畅
杨志毅
叶爱慧
机构:
[1] 湖南省怀化市第一人民医院遗传研究室!怀化,湖南省怀化市第一人民医院遗传研究室!怀化,湖南医科大学附属湘雅医院!长沙,湖南省怀化市第一人民医院遗传研究室!怀化,湖南省怀化市第一人民医院遗传研究室!怀化
来源:
关键词:
聚合酶链式反应;
热熔化;
苯酚-氯仿;
DNA分离;
D O I:
10.16288/j.yczz.2000.02.014
中图分类号:
Q781 [目的基因的获得];
学科分类号:
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要:
为了建立一种直接从普通琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简便实用的方法 ,采用聚合酶链式反应扩增人P53基因外显子7、8和其间的内含子7序列 ,用普通琼脂糖凝胶电泳,直接从凝胶中切下产物带 ,用加热熔化法回收DNA ;紫外比色法测定回收率 ;用测序法鉴定回收产物质量。并用QIAquickSpin纯化柱对照。结果表明 ,本法回收的产物质量明显优于用QIAquickSpin柱回收 ,本法回收的产物用于测序效果极佳 ,回收率达80% ,用QIAquickSpin柱回收率不到20% ,差异非常显著(P<0 01)。证明这种方法回收PCR产物质量可靠 ,能代替低熔点胶回收DNA ,有较大的实用价值
引用
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