肿瘤坏死因子α对心肌细胞内受磷蛋白表达和细胞内钙的调节作用

被引：6

作者：

姚宇玫 ^{[1
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胡申江 ^{[2
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黄元伟 ^{[2
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杨春虎 ^{[3
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孙坚 ^{[2
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朱朝晖 ^{[2
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吴涛 ^{[2
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机构：

[1] Department of Cardiology,Zhejiang Provincial Tongde Hospital

[2] 浙江大学医学院附属第一医院心内科暨心血管研究所

[3] Confocal Microscopy Lab,Zhejiang Provincial Key Laboratory of Bioelectromagnetics,Zhejiang University MedicalCollege

来源：

中国医学科学院学报 | 2005年 / 06期

关键词：

肿瘤坏死因子; 受磷蛋白; 肌浆网钙泵蛋白; 心肌细胞; 钙;

D O I：

暂无

中图分类号：

R541 [心脏疾病];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对培养的乳鼠心肌细胞内受磷蛋白(PLB)和肌浆网钙泵蛋白同功酶(SERCA2a)基因表达及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法体外培养的乳鼠心肌细胞被随机分成对照组和不同浓度TNFα(1、10、30、50、70μg/L)干预组,用单管一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblotting技术,观察TNFα对乳鼠心肌细胞PLB和SERCA2a基因表达的影响。采用Fluo-3/Am荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦显微镜下测定TNFα对单个乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度的影响。结果TNFα浓度依赖性增高PLBmRNA和蛋白质的表达,10、30、50、70μg/LTNFα组PLBmRNA表达量分别较对照组增加66%、106%、141%、189%(P<0.05),蛋白质的表达分别较对照组提高30%、48%、73%、114%(P<0.001)。而1μg/LTNFα组与对照组PLBmRNA和蛋白质表达差异均无显著性。TNFα不影响SERCA2a的表达。50μg/LTNFα作用细胞24h,能降低异丙肾上腺素刺激的[Ca2+]i变化幅度的增高,[Ca2+]i变化幅度较对照组减少33%(P<0.01),但对静息状态下[Ca2+]i变化幅度无影响。结论TNFα可增强心肌细胞内PLB的表达,降低心肌细胞内[Ca2+]i的变化,这可能与TNFα对心肌细胞的负性肌力作用有关。

引用

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