精氨酸脱亚胺酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化

被引：6

作者：

刘咏梅 ^{[1
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倪晔 ^{[1
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李娜 ^{[1
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李利峰 ^{[1
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孙志浩 ^{[1
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机构：

[1] 江南大学工业生物技术教育部重点实验室

[2] 江南大学生物工程学院

来源：

食品与生物技术学报 | 2011年 / 30卷 / 05期

关键词：

精氨酸脱亚胺酶; 克隆; 表达; 纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

通过PCR扩增得到菌株编码ADI的arcA基因,并构建表达载体pET24a-ADI。将该载体导入大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达ADI基因的重组菌。对ADI诱导表达条件进行优化,结果发现宿主菌在A600达到1.0时加入0.2 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),在30℃诱导4 h酶活最高,为2.04 U/mL发酵液。经超声波破碎、HiPrep DEAE FF阴离子交换层析、SuperdexTM200凝胶过滤层析,可获得SDS-PAGE电泳纯重组精氨酸脱亚胺酶(rADI)。rADI相对分子质量大小为92 600,由两个相同亚基组成,纯化后的rADI比酶活达20.9 U/mg。

引用

页码：750 / 756

页数：7

共 5 条

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