慢病毒靶向携带Akt1 shRNA对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响

被引：6

作者：

谭韡

于红刚

罗和生

周巍

机构：

[1] 武汉大学人民医院消化内科消化系统疾病湖北省重点实验室

来源：

中国医药导报 | 2017年 / 14卷 / 17期

关键词：

Akt1; 慢病毒载体; 胃癌; 凋亡;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.2 [胃肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA(Akt1-shRNA)对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响。方法构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞(SGC-LV-shAkt1)为实验组细胞,SGC7901细胞和转染慢病毒空载体SGC7901细胞(SGCLV-sh CON)为对照组细胞。Real-Time PCR检测Akt1 m RNA表达水平,Western blot检测胃癌细胞Akt1、phosphoAkt(ser473)和bcl-2蛋白表达水平,然后流式双染法、生长速率等方法检测Akt1 shRNA对SGC-7901细胞凋亡及增殖能力的影响。结果成功构建Akt1基因RNAi的慢病毒载体LV-shAkt1,病毒滴度为5×108 TU/mL。SGC-7901细胞转染后,实验组(SGC-LV-shAkt1)Akt1 m RNA和Akt1、p-Akt、bcl-2蛋白表达水平较对照组(SGC-7901、SGC-LV-sh CON)降低(P<0.01);(38.7±3.5)%的实验组细胞凋亡(P<0.05)。SGC-LV-shAkt1细胞生长曲线平缓,生长速度较另两种细胞(SGC-7901、SGC-LV-sh CON)明显降低。结论靶向Akt1的RNAi能有效抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,下调抗凋亡蛋白bcl-2有关。

引用

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