转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用

被引：11

作者：

吴永彬 ^{[1
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肖维威 ^{[1
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张宝 ^{[1
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蔡翠霞 ^{[1
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康文杰 ^{[1
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周琳华 ^{[1
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刘唐书 ^{[2
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马文丽 ^{[1
]}

机构：

[1] 南方医科大学基因工程研究所

[2] 广东省产品质量监督检验研究院

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2011年 / 27卷 / 08期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

转基因; 重叠延伸PCR; 质粒标准分子; 品系特异性检测; 实时荧光定量PCR;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2011.08.009

中图分类号：

TS207.3 [食品分析与检验];

学科分类号：

083201 ;

摘要：

本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应的荧光定量PCR检测体系,同时对该体系的扩增效率、精确度、灵敏度等指标进行了评估.结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测体系中,目标序列的扩增效率均在97.434%～101.479%正常范围内(R2≥0.995),定量极限为20 copies,表明我们已成功构建了这4种转基因作物的品系质粒标准分子,并能有效应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建.

引用

页码：775 / 782

页数：8

共 14 条

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