葎草花粉主要过敏原的分离鉴定与纯化

被引:2
作者
李莹 [1 ]
肖小军 [2 ]
柴文戍 [1 ]
谢水祥 [3 ]
何韶衡 [1 ]
杨平常 [1 ,2 ]
刘志刚 [1 ,2 ]
机构
[1] 辽宁医学院附属第一医院
[2] 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所
[3] 赣南医学院原生物学教研室
关键词
葎草; 花粉变应原; 离子交换层析;
D O I
10.16357/j.cnki.issn1000-5862.2014.01.019
中图分类号
R593.1 [变态反应性疾病];
学科分类号
摘要
采用液氮研磨法提取葎草花粉粗蛋白,凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白组分并测定各组分的相对分子质量,后经过离子交换层析法分离纯化几类主要的蛋白,再用westen blotting分别检测其与花粉过敏患者血清IgE结合情况,鉴定每种主要蛋白质致敏原的致敏性.分析了葎草花粉变应原成分及其变应原性、免疫原性,并鉴定主要过敏原的致敏性.SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,广泛的分布于8~170 kDa之间有主带13条,次带10余条;westen blotting检测发现葎草花粉的致敏性较强,与花粉过敏患者血清IgE结合能力较高.离子交换层析出4种主要变应原蛋白,其相对分子质量分别为55,16,15和25 kDa,其中结合能力最强的是15 kDa处蛋白条带.葎草的主要过敏原为55,16,15和25 kDa蛋白质组分.
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