用双标记时间分辨荧光免疫法同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A附视频

被引:24
作者
黄飚 [1 ]
张珏 [1 ]
马智鸿 [1 ]
张艺 [1 ]
朱岚 [1 ]
金坚 [2 ]
谢敏浩 [1 ]
机构
[1] 江苏省原子医学研究所
[2] 江南大学医药学院
关键词
黄曲霉毒素B1; 赭曲霉毒素A; 时间分辨荧光免疫分析; 抗体; 食品检测;
D O I
暂无
中图分类号
R446.6 [免疫学检验];
学科分类号
100208 [临床检验诊断学];
摘要
目的采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法。方法将AFB1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1、OTA共同竞争有限的抗AFB1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体、Sm3+标记羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立AFB1/OTA-TRFIA。结果该方法检测AFB1的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02~100μg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为3.2%和7.3%,平均回收率为88.1%;检测OTA的灵敏度为0.05μg/L,测量范围为0.05~50μg/L,批内和批间CV分别为2.9%和7.9%,平均回收率为89.9%,AFB1/OTA-TRFIA检测时,AFB1与OTA不相互干扰。样品经双标记AFB1/OTA-TRFIA与单标记AFB1-TRFIA、OTA-TRFIA同时检测,与AFB1-TRFIA两者检测AFB1结果的相关系数为0.972,与OTA-TRFIA两者检测OTA结果的相关系数为0.981,说明结果相符。结论AFB1/OTA-TRFIA灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,一次操作可以同时得到AFB1、OTA的两个结果,是一种简便、快速、经济的可进行大批量样品筛查的方法。
引用
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