应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒附视频

被引：18

作者：

花群义

金宁一

周晓黎

董俊

杨云庆

徐自忠

机构：

[1] 云南出入境检验检疫局技术中心

[2] 解放军军需大学军事兽医研究所

[3] 云南出入境检验检疫局技术中心云南昆明

[4] 吉林长春

[5] 云南昆明

来源：

中国兽医学报 | 2005年 / 02期

关键词：

口蹄疫病毒; 荧光定量RT-PCR; 检测;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2005.02.002

中图分类号：

S854.4 [兽医诊断学];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L 的引物浓度和 2 0 0 nmol/ L 探针浓度 ,获得的 CT值较小 ,而 ΔRn最大 ;可检测到相当于 0 .1 TCID50 的病毒 RNA;与 VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应 ;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系 ,且线性范围宽 ,相关系数为 0 .984 ;组内和组间试验重复性的变异系数 (CV)分别为 5 .4 %和 6 .7% ;与常规 RT- PCR相比较 ,该方法具有快速、特异、敏感、可定量 ,并可同时检测大量样品等优点

引用

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页数：4

共 2 条

[1] Development of a novel real-time RT-PCR assay for quantitation of foot-and-mouth disease virus in diverse porcine tissues [J].

Oleksiewicz, MB ;

Donaldson, AI ;

Alexandersen, S .

JOURNAL OF VIROLOGICAL METHODS, 2001, 92 (01) :23-35

[2]

Diagnosis of foot-and-mouth disease by RT-PCR: evaluation of primers for serotypic characterisation of viral RNA in clinical samples[J] . Scott M Reid,Geoffrey H Hutchings,Nigel P Ferris,Kris De Clercq.Journal of Virological Methods . 1999 (1)

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