人eIF4E基因shRNA慢病毒载体的构建及鉴定

被引：1

作者：

鲁强 ^{[1
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张志磊 ^{[1
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郭韡 ^{[2
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邢伟 ^{[2
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徐祥 ^{[2
]}

赵淑萍 ^{[1
]}

机构：

[1] 青岛大学医学院附属医院妇科

[2] 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室

来源：

青岛大学医学院学报 | 2011年 / 47卷 / 03期

关键词：

真核细胞起始因子4E; 慢病毒属; 质粒; 遗传载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R737.33 [子宫肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的设计并构建人真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)基因shRNA慢病毒质粒表达载体。方法设计合成人eIF4E基因RNA干扰双链DNA片段,重组到慢病毒质粒PLVTHM上,然后进行PCR鉴定和测序分析。重组质粒与3种包装质粒混合,以LipoD293TMDNA In Vitro包裹后转染293T细胞,收获病毒上清液感染宫颈癌HeLa细胞。结果经过PCR鉴定出的重组载体测序结果与目的序列一致,成功构建人eIF4E基因shRNA慢病毒质粒表达载体及获得相应慢病毒,并成功感染HeLa细胞,可见绿色荧光蛋白表达。结论成功构建人eIF4E基因shRNA慢病毒载体,为进一步研究宫颈癌基因治疗奠定基础。

引用

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页码：197 / 199+203 +203

页数：4

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共 3 条

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